Ул. "Коршунова" G. "Трансгенезис в пъдпъдъци"

Извадки от резюмето на автора за докторска степен по биологични науки, Москва, 2012 г.


1. Общи характеристики на работата
2. Материал и методи на изследване
3. Резултати от изследванията
данни
Информация за практическото използване на резултатите от научните изследвания
Препоръки за използване на научни заключения
Списък на произведения, публикувани по темата на дисертацията

1. Общи характеристики на работата

Неотложна тема

Съвременният подбор в птицевъдството се основава на избора на най-добър добитък от високодоходни семейства и семейства и изисква дълго време. Един от нетрадиционните подходи към генетичното подобрение на птицата може да бъде трансгензис-вмъкване в своя геном на чужди гени. Въпреки техническите трудности, работи върху създаването на трансгенни птици като сегашните тенденции в aktivnovedutsya индустрия в много страни като обещава от ekonomicheskoyvygody на гледна точка, способността да се постигне ефектът на подбор в краткосрочен план. Възможности Transgenezrasshiryaet животни с променени характеристики, много откъде сте могат да бъдат използвани в подбора, елиминирайки neobhodimostdlitelnyh обратно кръстосване да премахнете от население от "ненужни" гени неизбежно, предавани при нормална хибридизация. Очевидно е, че metodamitransgeneza може да бъде въведен в популация напълно нови fenotipicheskiepriznaki кодирани от гени от други видове и родове на животни.


Цел и цели на изследванията

Основната цел на тази работа е да се изследват ефектите от интегрираното генно конструиране, като генът на бика растежен хормон върху биологичните и продуктивни признаци на генетично модифицираните пъдпъдъци.

Във връзка с гореизложеното бяха зададени следните задачи:

- получавате трансгенни пъдпъдъци с вградения говежди растежен хормон ген-

- да се оцени експресията на трансген, биологични и продуктивни пъдпъдъци pokazateleytransgennyh между поколенията: динамиката на растеж и имунната statusperepelov, хормоналния статус на кръв, много пъдпъдъчи яйца, тяхното biohimicheskiysostav и морфологичните показатели на производството на яйца.


Научна новост на работата

За първи път извърши бърза оценка на трансгена, генетични и fenotipicheskiyanaliz трансгенни ген говеда растежен хормон пъдпъдъци получи metodommikroinektsii екзогенна ДНК в зародишен диска на яйца, и тяхното потомство е малко вероятно поколения.

За първи път е доказана възможността за значително подобрение на производителността на птица чрез методите на трансгенеза, като се използва примерът на трансгенно пъдпъдъци за ген на растежен хормон на бика.


Практическа стойност на работата

Пъдпъдъци експериментална група, потомците на трансгенни ген говежди растежен хормон в ryadupokoleny запазват превъзходство на телесното тегло от 5-15%, и масата на яйца с 10-20% в сравнение с конвенционалните, което предполага възможна prakticheskomispolzovanii трансгенеза в размножаване работа, насочена към povyshenieproduktivnyh показатели на птица за кратко време. Одитът на производството потвърди резултатите от изследването. Разликата в теглото на яйцата от пъдпъдъци с трансгенна и естонска порода е 18,7%.

Изследователските материали формират основата за разработения метод за селекция на яйчни пъдпъдъчи яйца (патент на Руската федерация № 2402209). Резултатите от измерванията на седмични тегло yaitsperepelok различаващи се средните стойности от 7- до 50-седмична възраст vozrastapozvolili определи подходящ за оценка на пъдпъдъците etomupriznaku (11-12 седмици). На тази възраст яйчната маса съответства на средните показатели за целия период на понасяне на яйца.


Основни разпоредби, които трябва да бъдат защитени

В резултат на извършеното проучване и проверката на производството са разработени и са защитени следните основни разпоредби:

1. трансгенна експресия в пъдпъдък, произведен от микроинжектиране gennoykonstruktsii ген говежди растежен хормон в ембрионални яйца дискове и ihpotomkov редица поколения.

2. Растеж, производителност, хормонален статус на кръвта, имунен статус на трансгенния хормон на растежния хормон на пъдпъдък бик и техните потомци в редица поколения.


Апробация на работата

Основните материали по дисертацията бяха представени на VNITIP Научния съвет vezhegodnyh доклади 1980-2010 g.g.- 11 All-съюз симпозиум за biohimiimitohondry, Pushchino (1981) - All-съюз симпозиум по биохимия селскостопанска животни, Витебск (1982) - на научна и методическа комисия за подбор и genetikeptitsevodstva добитък на отдела за аграрни науки (1983) - на Vsesoyuznombiohimicheskom Конгреса, Киев (1986) - All-съюз симпозиум "Biohimiyaselskohozyaystvennyh животните и хранителната програма", Ташкент (1986) - НА2 съюз симпозиум "научни основи на витамин храна селскостопанска животни ", Юрмала (1987) - All-съюз Научно-техническа конференция на" Effektivnoeispolzovanie хранят с домашни птици ", Новосибирск (1990) - All-съюз nauchnoykonferentsii" Използването на физически и биологични фактори във ветеринарния izhivotnovodstve "Витебск (1991) - на украински конференция mezhdunarodnymuchastiem "Актуални проблеми на съвременното птицевъдство", Харков (1991) - namezhdunarodnom симпозиума "молекулярна генетика и биотехнологии в оценката iizmenenii геномите на земеделските животни ", Санкт Петербург, Пушкин (1994) - на ezhegodnyhotchetah в отдела на животновъдството и животновъдство (1995-2005 гг.) - nanauchnyh конференция" Актуални проблеми на биотехнологиите в производството на растителни култури, животновъдството и ветеринарната медицина ", Москва (1996 г., 2000 жж) -. II да Mezhdunarodnoyvystavke "иновации-99. Живите системи технологии "Руска vystavochnyytsentr, Москва (1999), където той бе удостоен с грамота от II степен за развитието на" производството на трансгенни птици "- в." Фокусирани fundamentalnyeissledovaniya и тяхното реализиране в Руската селскостопанския сектор " Санкт Петербург (2008), XVIkonferentsii руския клон на Асоциацията на Световната птицевъдство към "Напредъкът в съвременното птицевъдство: Научни изследвания и иновации", Сергиев Posad2009) - както и в чужбина в 10 европейски Птици конференция, Йерусалим, Израел (1998) - на 6 от конференцията на балтийските страни за птици, Вилнюс, Литва (1998), 8 конференция на балтийските страни за птици, Турку, Финландия (2000) - 21 Международен конгрес за домашни птици, Монреал, Канада (2000).


Публикуване на резултатите от изследванията

Основните резултати от научните изследвания са публикувани в VNITIP писания materialahRosselhozakademii, национални и международни научни конференции, изследователски и производствени nauchnyhi списания, информация експресна информация. Общо Potem теза публикувани 56 статии, в това число 14 в списания, препоръчани от ВАК на Министерството на образованието и науката на Руската федерация, metodicheskoerukovodstvo за зоотехнически лаборатории "Оценка на качеството на фуражите, органи, тъкани, яйца и птиче месо", 1998 г., получи патент на Руската федерация (2009 .) на изобретението.

Научните изследвания, проведени в съответствие с плана на Националния изследователски и технологичен институт ptitsevodstvanyne GNU VNITIP Rosselkhozacademia темата (1980-2010 GG.): "Да се ​​разработят методи prognozirovaniyayaytsenoskosti пилета чрез въвеждане на ранните екзогенни хормони" №gos. рег. 81090364- "Развитие на генен трансфер в птичи геном» № състояние. reg.01980008817 ", разработване на нови и усъвършенстване на съществуващите metodypolucheniya трансгенни птици с предписаните признаци», № състояние. рег. 01200120268- "разработи методи за производство на генетично модифицирани птици tsennymihozyaystvennymi признаци», № състояние. рег. 01200602327.


Обхват и структура на работата

Дисертацията се състои от следните раздели: vvedenie- obzorliteratury- материал и техника issledovaniy- научни постижения, както и списък на литературата е ihobsuzhdenie- leads- приложение. Съдържащият се в 305stranitsah машинописен текст, илюстрирани с 44 маси и 26 risunkami.Spisok литература включва 644 библиографски източници, включително 205otechestvennyh и 439 чуждестранни автори. Приложението включва dopolnitelnyetablitsy и чертежи, илюстриращи резултатите issledovaniy- naizobretenie RF патент №2402209 «Метод избор пъдпъдъчи яйца от теглото", 2009- Aktproizvodstvennoy тест, 2009- идентичност на ratsionalizatorskoepredlozhenie, 1981- Методологическа Guide, 1998.


Личен принос на кандидата

Авторът принадлежи към отчета за дисертация на тема, нейното развитие и reshenie.Eksperimentalnaya на работата и обработката на резултатите vypolnenaneposredstvenno от лично участие на дисертация автор и съавтор ssoispolnitelyami, което е отразено в списъка с публикации по темата на научните изследвания.


2. Материал и методи на изследване

Изследвания върху получаването и изследването на биологична и продуктивна kachestvperepelov трансгенни ген говежди растежен хормон, проведено през 1994-2010 godahna естонски пъдпъдък порода в условия вивариум Сю "Zagorsk EPH VNITIPRosselhozakademii" (Москва област). Птицата съхраняват в отделен kletkahpri свободен достъп до вода и хранят. Технологични параметри на съдържанието на фуражите за животни ipitatelnost съобразени с приетите норми.

Трансгенни птици се получават чрез микроинжектиране на екзогенна ДНК в ембрионални дискове на яйцеклетки. Инжектираната генна конструкция pMTbGH (2 * att) е предоставена от Института по молекулярна биология на Руската академия на науките (Москва).

Блот-хибридизационен анализ на ДНК и полимеразна верижна реакция (PCR) бяха използвани за идентифициране на трансгенни пъдпъдъци. PCR продуктите се анализират чрез метода на електрофореза.

Анализ на експресията на трансгени бе извършен на протеиново ниво: изследване на плазминотичната активност върху говежди соматотропин чрез ензимен имуноанализ.

В проучванията имаше две групи пъдпъдъци - експериментални и контролни. Експерименталната група включва потомци (33 поколения) от трансгенни индивиди, контрола - естонски пъдпъдък от 33 поколения.

Животните в поколения варира от 45 до 110. Оттегляне на потомство в експерименталните групи се извършва ikontrolnoy естествено чифтосване osobey.Kazhdaya конкретен човек от експерименталната група е с код в компютърна база данни, тя позволява да се проследи родословието, вариращи от първични трансгенни животни.

Записани параметри: телесно тегло на ден и възраст на седмична основа, в techenie20 седмици, индивидуално производството на яйца и теглото на яйцата за 10 mes.produktivnogo период, яйца биохимични показатели (Fisinin VI, TishenkovA.N., 1998), съдържанието на мастни киселини липидната жълтък (Архипов AV, ToporovaL.V, 1976), морфологични индекси на яйца (Dyadichkina LF, NS Поздняков, 2001). Кръвната плазма се определя съдържанието на инсулин tetraiodothyronine (тироксин Т4), трийодтиронин (Т3), радиоимуноанализ (Radchenkov VP, VS Аверин, Butrov EV, 1985). Имунния статус пъдпъдъчи оценяват титрите ponarastaniyu антитела в кръвта и яйчен жълтък в отговор на определената реакция antigena.Antitela забавят хемаглутинацията (RZGA) (Metodicheskieukazaniya, 1997).